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在多種癌癥（如鼻咽癌、結(jié)直腸癌和乳腺癌）中，CCT5（ChaperonincontainingTCP1subunit5）的表達(dá)顯著上調(diào)，且其在腫瘤細(xì)胞的增殖、侵襲及轉(zhuǎn)移過(guò)程中發(fā)揮重要作用。研究表明，通過(guò)RNA干擾（RNAi）技術(shù)或小分子抑制劑等手段抑制CCT5的表達(dá)，可能有效阻斷...
酵母質(zhì)粒提取可以用試劑盒提取，也可以直接用裂壁酶處理后采用堿裂解法提取質(zhì)粒。推薦使用索萊寶供應(yīng)的酵母質(zhì)粒提取試劑盒，無(wú)需使用酚、CCL4等有毒試劑，操作安全。下面我們就用索萊寶酵母質(zhì)粒提取試劑盒為例講解酵母質(zhì)粒提取方法和步驟。1.接種單菌落(待檢測(cè)酵母細(xì)胞)于25mLYNB(補(bǔ)加...
dna提取是一項(xiàng)經(jīng)常要做的實(shí)驗(yàn)，下面我們就總結(jié)了四種dna提取方法并做詳細(xì)說(shuō)明和比較。一.濃鹽法提取dna：A.利用RNA和DNA在電解溶液中溶解度不同，將二者分離，常用的方法是用1M氯納提取化鈉抽提,得到的DNP粘液與含有少量辛醇的CCL4一起搖蕩,使乳化,再離心除去蛋白質(zhì),此...
問(wèn)題1：使用瓊脂粉配置的MS培養(yǎng)基顏色明顯變黃？影響實(shí)驗(yàn)？產(chǎn)品批次不一樣，有些批次的瓊脂粉就是顯黃色，不是質(zhì)量問(wèn)題，不影響使用。進(jìn)口產(chǎn)品也有直接指出瓊脂粉是黃色為正?，F(xiàn)象。問(wèn)題2：凝膠強(qiáng)度？答：凝膠強(qiáng)度（1.5%）≥800g/cm2800-1200g/cm21.5g瓊脂粉溶于10...
培養(yǎng)基是供微生物、植物組織和動(dòng)物組織生長(zhǎng)和維持用的人工配制的養(yǎng)料。一般分為天然培養(yǎng)基、組合培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基等，那我們常用的剛果紅培養(yǎng)基屬于哪一類的？剛果紅培養(yǎng)基屬于哪一類培養(yǎng)基：剛果紅培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基,因?yàn)楹竽茉谂囵B(yǎng)基上看到因分解纖維素形成的透明圈,在液體培養(yǎng)基...
如何選擇合適的宿主菌：1、所選的宿主菌株應(yīng)對(duì)所用質(zhì)粒的抗生素抗性基因敏感。2、如進(jìn)行藍(lán)/白斑篩選，宿主菌β-半乳糖苷酶的α-肽編碼區(qū)應(yīng)在染色體或附加體上缺失掉(lacZΔΜ15)。*0和DH5α都能用于藍(lán)/白斑篩選。3、要表達(dá)重組蛋白，可使用帶有可誘導(dǎo)的T7RNA聚合酶基因的菌株...
1.緩沖系統(tǒng)：在沒(méi)有離子存在時(shí)，電導(dǎo)率小，DNA不遷移，或遷移極慢，在高離子強(qiáng)度的緩沖液中，電導(dǎo)很高并產(chǎn)熱，可能導(dǎo)致DNA變性，因此應(yīng)注意緩沖液的使用是否正確。長(zhǎng)時(shí)間高壓電泳時(shí)，常更新緩沖液或在兩槽間進(jìn)行緩沖液的循環(huán)是可取的。2.瓊脂糖：不同廠家、不同批號(hào)的瓊脂糖，其雜質(zhì)含量不同...
SDS，這是一種常用試劑，全名是十二烷基硫酸鈉，大家經(jīng)常用到，對(duì)于分子研究的科咖們，幾乎每天都會(huì)用到。先還是讓我們來(lái)看看萊寶百科吧。萊寶百科：十二烷基硫酸鈉（SDS）是一種白色粉末狀物質(zhì)，易飄飛，是常用的生化試劑，分子式是C12H25NaSO4,CAS號(hào)是151-21-3。主要是...
RNA提取詳解 2016-09-23
RNA提取RNA提取試劑盒簡(jiǎn)介：RNA是一種重要的遺傳信息分子，因此完整RNA的提取和純化，是進(jìn)行Northern雜交、RT-PCR、定量PCR等RNA相關(guān)研究的重要前提。RNA提取的原理與方法：細(xì)胞中的RNA可以分為信使RNA、轉(zhuǎn)運(yùn)RNA和核糖體RNA三大類，這三類RNA都存在...
常見(jiàn)問(wèn)題未回收或回收率低可能原因膠塊未全部溶解建議解決方案溶解凝膠時(shí)應(yīng)該置于65℃水浴，不斷上下顛倒，確定膠塊*溶解后再進(jìn)行下一步操作。如果凝膠濃度較大，可增加溶膠液使用量?？赡茉蚰z塊太大(400mg)建議解決方案如果需要處理的膠塊太大，應(yīng)該先將其切成小塊，做兩次回收或選用大量...
DNA純化回收 2016-09-21
DNA產(chǎn)物純化試劑盒簡(jiǎn)介：對(duì)于TA克隆、酶切或者直接測(cè)序等試驗(yàn)來(lái)說(shuō)，純化PCR產(chǎn)物或酶切產(chǎn)物是非常必要的。以TA克隆為例，其成功率跟目的片段的純度高低有重要關(guān)系。雖然未經(jīng)過(guò)純化的PCR產(chǎn)物也可以跟載體連接，但會(huì)增加篩選陽(yáng)性克隆的難度，因?yàn)镻CR產(chǎn)物中的dNTP和引物等可能也會(huì)跟載...
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