TBST是TBS+Tween的縮寫,生物實(shí)驗(yàn)中提到的PBST是指PBS溶液加上Tween-20。那么tbst與pbst都有上面區(qū)別呢?
tbst與pbst的區(qū)別:
1、TBST的pH值隨溫度變化大一點(diǎn),而PBST似乎容易有沉淀,若稀釋抗體后需要反復(fù)使用的話建議使用TBST溶解。
2、兩種洗液用起來沒有什么區(qū)別,都是提供一個緩沖的PH值環(huán)境,加上吐溫20有助于蛋白的洗脫。PBST的磷酸鹽緩沖液加Tween-20,而TBST是Tris緩沖液加Tween-20。
PBS溶液是指磷酸緩沖液(Phosphate Buffer Solution),滲透壓近似于生理條件又有很強(qiáng)的pH緩沖能力,常用來洗細(xì)胞(不易漲裂)和作為細(xì)胞培養(yǎng)的基礎(chǔ)液(pH緩沖)。
TBS緩沖液是生物學(xué)中常使用的等滲緩沖鹽溶液,主要用于免疫組化和原位雜交,酶聯(lián)免疫等實(shí)驗(yàn)中,清洗免疫印跡實(shí)驗(yàn)中非特異性結(jié)合的抗體等。由 Tris-HCl 構(gòu)成穩(wěn)定的 PH 緩沖體系,NaCl 提供等滲條件.
TBST的配置
先稱量NaCl40g,倒入燒杯中;
加DDW蒸餾水400ml,再稱量NaCl?47.6g;倒入剛才的那個燒杯中(PS:由于NaCl的量太多,一次稱量不方便,所以分兩次稱量,且易于溶解);
往燒杯中加入Tris—HCl緩沖液100ml;
后加(吐溫20)5ml;
轉(zhuǎn)入1000ml容量瓶中,在定容,轉(zhuǎn)移即可。