細(xì)胞培養(yǎng)的消毒方法:
消毒方法分為三類:物理滅菌法(紫外線、濕熱、干烤、過濾等),化學(xué)滅菌法(各種化學(xué)消毒劑)和抗生素。
(1)紫外線消毒:用于空氣,操作臺表面和不能使用其它法進(jìn)行消毒和培養(yǎng)器皿。紫外線直接照射方便、效果好,經(jīng)一定的時間照射后,可以消滅空氣中大部分細(xì)菌,培養(yǎng)室紫外線燈應(yīng)距地面不超過2.5 米,且消毒進(jìn)物品不宜相互遮檔,照射不到的地方起不到消毒作用。紫外線可產(chǎn)生臭氧,污染空氣,試劑及培養(yǎng)液都有不良影響,對人皮膚也有傷害,不宜近照射。
(2)溫?zé)嵯荆杭锤邏赫魵庀?,是一種使用廣泛、效果好的消毒方法。溫?zé)嵯緯r,消毒物品不能裝得過滿,以防止消毒器內(nèi)氣體阻塞而千百萬危險,保證其內(nèi)氣體的流通。在加熱升壓之前,先要打開排氣閥門排放消毒器內(nèi)的冷空氣,冷氣空氣排出后,關(guān)閉排氣閥門,同時檢驗安全閥活動自如,繼后開始升壓,當(dāng)達(dá)到所需壓力時,開始記算消毒時間。消毒過程中,操作者不能離開工作崗位,要定時檢查壓力及安全,防止消毒及表皮意外事件發(fā)生。
常用物品消毒壓力及時間:
培養(yǎng)液、平衡鹽溶液及其它需要滅菌的液體:121℃, 15 磅, 20 分鐘;
布類、玻璃制品、金屬器械等物品:先121℃, 15 磅, 20 分鐘,然后在烘箱中烘干;
玻璃瓶:干熱滅菌170℃, 4 小時。
(3)化學(xué)消毒法:常見的是70%酒精及1‰的新潔而滅,前者主要用于操作者的皮膚,操作臺表面及無菌室內(nèi)的壁面處理。后者則主要用器械的浸泡及皮膚和操作室壁面的擦試消毒?;瘜W(xué)消毒法操作簡單、方便有效。
(4)抗生素消毒:主要用于培養(yǎng)用液滅菌或預(yù)防培養(yǎng)物污染。