方法原理
1.雙抗體(原)夾心法:檢測抗原(體)的常見方法,應(yīng)用針對抗原兩個(gè)不同決定族的兩種單抗分別作為固相載體和酶標(biāo)抗體檢測溶液中的抗原(適用于二價(jià)以上抗原,不能測 小分子半抗原)。
2.間接法:檢測抗體的方法,利用酶標(biāo)記的抗抗體(第二抗體)檢測已與固相抗原結(jié)合的抗體。
3.競爭法:檢測抗原或小分子半抗原、抗體,以測抗原為例,使待測抗原和酶標(biāo)抗原競爭與固相抗體結(jié)合,結(jié)果如待測抗原含量越多,與固相抗體結(jié)合的酶標(biāo)抗原就越少,顯色越淺,二者呈負(fù)相關(guān)。
◎操作注意
① 使用干凈的塑料容器配置洗滌液,使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
② 洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
③ 底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
ELISA試劑盒質(zhì)控分析
1.人員培訓(xùn)內(nèi)容包括:①檢驗(yàn)項(xiàng)目的基本原理(ELISA試劑盒原理);②熟悉檢測技巧,了解易出差錯(cuò)的環(huán)節(jié)及難點(diǎn);熟悉檢測試劑性能(包括試劑盒組成,包被片段及其組成);③熟悉檢測儀器的原理及性能;掌握數(shù)據(jù)處理的能力和質(zhì)量控制知識(shí);④某些特殊項(xiàng)目的檢測如抗HIV等需經(jīng)有關(guān)部門組織的專門培訓(xùn)班,考試合格后持證上崗。
2.基本了解
① 1971年Engvall等人把免疫組化的EIA技術(shù)應(yīng)用于臨床檢驗(yàn)發(fā)展為ELISA試劑盒技術(shù)。
② 特點(diǎn):ELISA試劑盒在固相表面組裝免疫活性物質(zhì)形成"免疫吸附劑"。
③ 酶標(biāo)記免疫活性物質(zhì),進(jìn)行信號(hào)放大;
④ 有二步溫育反應(yīng)二次洗滌過程;
⑤ 靈敏度特異性相對較高。
⑥ 局限性:只能檢測到ng水平
⑦ 精密度差(批內(nèi)CV15-20%);
ATG16A 整合素αVβ1抗體
ATG18/WIPI1 整合素αM/巨噬細(xì)胞表面分子抗體
ATG3 整合素αL抗體
ATG4A 整合素αE抗體
ATG4C 整合素α7抗體
ATG4D 整合素α6抗體
ATG7 整合素α5抗體
ATG8/GABARAPL2 整合素α4抗體
ATG9A 整合素α4β7抗體
ATG9B 整合素α3抗體
ATGL/PEDFR 整合素α3β1抗體
ATH III 整合素α2抗體
ATM 整合素α1抗體
ATP citrate lyase 整合素alpha E2 抗體
ATP1b2/Na+K+ATPase 真核延伸因子激酶2抗體
ATP2c1 真核啟動(dòng)因子2α抗體
ATP4B 真核翻譯延長因子2抗體
ATP5J 真核翻譯起始因子4G抗體
ATP7A 真核翻譯起始因子4E抗體
ATP7B 真核翻譯起始因子4B抗體
ATRN 真核翻譯起始因子3H抗體
ATXN1 真核翻譯起始因子3F抗體
AU1 tag 真核翻譯起始因子3A抗體
AU5 tag 粘著斑激酶抗體
Aurora A/ARK-1 粘膜血管定居因子抗體
Aurora A/B/C 粘膜相關(guān)上皮趨化因子28抗體
Aurora B/STK-1 粘附相關(guān)激酶抗體
Aurora C 粘附分子相關(guān)蛋白a1抗體
AVEN 粘蛋白-5B抗體
AVPR2 粘蛋白-4抗體
Axin1 粘蛋白-3抗體
AXL 粘蛋白-2/上皮膜抗原2抗體
B7-1/CD80 粘蛋白-1/上皮膜抗原抗體
B7-DC/CD273 增殖細(xì)胞核抗原抗體
B7-H1/CD274 增殖細(xì)胞核抗原抗體
B7H4 增殖細(xì)胞核抗原抗體
BAAT 增殖細(xì)胞核抗原抗體
ELISA試劑盒 BACE1/ASP2 增殖潛能相關(guān)蛋白抗體
BACH1/BRIP1 增食欲素-A/欲激素A
Bad 增生肉蛋白1抗體
Bad 造血細(xì)胞磷酸酶抗體
BADH2 造血細(xì)胞激酶抗體