BCA 蛋白濃度測定試劑盒檢測蛋白濃度的原理及特點
堿性條件下,蛋白將Cu2+還原為Cu+, Cu+與BCA試劑形成紫藍色的絡(luò)合物,測定其在562nm處的吸收值,并與標準曲線對比,即可計算待測蛋白的濃度。常用濃度的去垢劑SDS,Triton X-100,Tween不影響檢測結(jié)果,但受螯合劑(EDTA, EGTA)、還原劑(DTT,巰基乙醇)和脂類的影響。實驗中,若發(fā)現(xiàn)樣品稀釋液或裂解液本身背景值較高,可試用考馬斯亮藍(Bradford)蛋白濃度測定試劑盒。
BCA 法蛋白濃度檢測比考馬斯亮藍試劑要靈敏的多。操作簡便,使用方便。
BAC蛋白濃度測定試劑盒的特點
1.步驟簡單,45分鐘內(nèi)完成測定,比經(jīng)典的Lowry法快4倍而且更加方便。
2.靈敏度高,檢測濃度下限達到25μg/ml,小檢測蛋白量達到0.5μg,待測樣品體積為1-20μl 。
3.BCA法測定蛋白濃度不受絕大部分樣品中的去污劑等化學物質(zhì)的影響,可以兼容樣品中高達5%的SDS,5%的Triton X-100,5%的Tween 20, 60, 80。
4.在20-2000μg/ml濃度范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系。
5. 檢測不同蛋白質(zhì)分子的變異系數(shù)遠小于考馬斯亮藍法蛋白定量。
注意事項
1.長期不用時,Cu試劑與PBS稀釋液可置于2-8℃保存,如發(fā)現(xiàn)細菌污染則應(yīng)丟棄。BCA試劑在低溫條件下出現(xiàn)結(jié)晶沉淀時,可37℃溫育使其*溶解,不影響使用。
2.樣品中若含有較多干擾物質(zhì)時,請采用Bradford蛋白濃度測定試劑盒。
3.為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。