紅細胞裂解液裂解是一種比較溫和的紅細胞去除方法,它能既不損傷有核細胞又能充分的去除紅細胞。那么紅細胞裂解液的原理是怎么樣的呢?
裂解液作用原理
血紅細胞表面上有紅細胞專屬的表面抗原,當裂解液中含可以攻擊特定紅細胞表面抗原的酶的時候就只會造成紅細胞的變形,生物通道擴大膨脹裂解,或者引起紅細胞的變形,而不會攻擊其他細胞;另外紅細胞有自己的電負性,滲透脆性(通常是一些非酶細胞裂解液的突破點),懸浮穩(wěn)定性,這都是區(qū)別于其他種類細胞的區(qū)別點。紅細胞裂解液就是利用這些特性裂解紅細胞的。另外紅細胞裂解液不能達到100%準確的裂解紅細胞,總會或多或少導致其他種類細胞的裂解。
裂解液配制方法
紅細胞裂解液可以自己動手配制,也可以購買公司成品。索萊寶提供成品紅細胞裂解液出售。價格合理,質量穩(wěn)定,歡迎選購。
紅細胞裂解液是一種去除紅細胞簡便易行的方法。下面詳細介紹紅細胞裂解液配制方法和步驟。先列出配制紅細胞裂解液所需的材料:
配置所需材料
1. Ammonium Chloride 10x Lysing Concentrate Solution
a) NH4Cl 80 g
b) KHCO3 10 g
c) Na2EDTA 3.7 g
d) Distilled H2O 1000 mL
2. 1N HCl or 1N NaOH(調(diào)節(jié)pH值用)
配置步驟
1. 將以上a、b、c試劑溶于900ml 去離子水中;
2. 加去離子水定容到1000ml,調(diào)節(jié)溶液pH值到7.2-7.4,用0.22um的濾器過濾,2-8°C保存?zhèn)溆?/span>;
3. 在制備工作液時,將此儲存液稀釋10倍后使用。
保存方法
1. 10x 儲存液儲存于2-8°C不能超過半年(六個月);
2. 使用時根據(jù)需要稀釋,每次用都應用去離子水新鮮配制工作液,當日用不完的可廢棄。