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  • 植物脫氫酶(PDHA)活性檢測(cè)試劑盒 其它
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產(chǎn)品名稱:

植物脫氫酶(PDHA)活性檢測(cè)試劑盒 其它

產(chǎn)品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價(jià)格:
廠商性質(zhì): 生產(chǎn)廠家 產(chǎn)品時(shí)間: 2024-07-29
儲(chǔ)存條件
2-8℃
中文名稱
植物脫氫酶(PDHA)活性檢測(cè)試劑盒 其它
有效期
6個(gè)月
單位

英文名稱
Plant Dehydrogenase(PDHA) Activity Assay Kit
檢測(cè)方法
可見分光光度法 Spectrophotometer
規(guī)格
50T/24S
自備試劑
該試劑盒實(shí)驗(yàn)過程中需自備試劑,詳情見網(wǎng)站說明書

產(chǎn)品概述

品牌SOLARBIO/索萊寶CAS詳詢
分子式詳詢純度詳詢
分子量詳詢貨號(hào)BC3120
規(guī)格50T/24S供貨周期現(xiàn)貨
主要用途植物脫氫酶(PDHA)活性檢測(cè)應(yīng)用領(lǐng)域環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,綜合

植物脫氫酶(PDHA)活性檢測(cè)試劑盒說明書
可見分光光度法
貨號(hào): BC3120
規(guī)格: 50T/24S
產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,有疑問請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱規(guī)格保存條件
試劑一粉劑×22-8℃保存
試劑二液體100 mL×1瓶2-8℃保存
試劑三液體100 mL×1瓶 (自備)2-8℃保存

溶液的配制:

  1. 試劑一:使用前加少量水溶解,定容至30 mL,避光、4℃保存(盡量現(xiàn)配現(xiàn)用);

  2. 試劑三:自備乙酸乙酯。提供一60mL棕色試劑瓶。

產(chǎn)品說明:
生物體的脫氫酶(Plant dehydrogenase , PDHA)的活性在很大程度上反映了生物體的活性狀態(tài),能直接表示生物細(xì)胞對(duì)其基質(zhì)降解能力的強(qiáng)弱。
受氫體2,3,5-氯化三苯基四氮唑(2,3,5-Triphenyl Tetrazolium Chloride,即TTC)在細(xì)胞呼吸過程中接受氫以后,其還原產(chǎn)物三苯基甲替(Triphenyl Formazone,即TFF)呈現(xiàn)紅色,在波長(zhǎng)485nm處有最大吸收峰,采用分光光度法于485nm測(cè)定其吸光值,即得植物脫氫酶活性。
注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品:
臺(tái)式離心機(jī)、可見分光光度計(jì)、水浴鍋、1mL玻璃比色皿、可調(diào)式移液槍、冰、研缽/勻漿器、蒸餾水、乙酸乙酯(不允許快遞,請(qǐng)用戶自備)。
操作步驟:
一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量,具體比例可以參考文獻(xiàn))
稱取0.1g的植物組織,用雙蒸水清洗3-4次,用濾紙吸干水分,備用。
二、測(cè)定步驟

  1. 可見分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至485nm乙酸乙酯調(diào)零。

  2. 操作表:取5mLEP管依次加入

加入試劑對(duì)照管測(cè)定管
樣本(g)0.10.1
試劑一(mL)-1
試劑二(mL)21
充分混勻,37℃,暗培養(yǎng)3h,取出后立即冰浴5min,去濾液,盡量用濾紙吸干樣本,置于研缽/勻漿器中。
試劑三(mL)11
充分研磨(建議在通風(fēng)櫥操作)后全部移至離心管中,用少量試劑三沖洗研缽,一起加入離心管,用試劑三定容至2mL,10000rpm/min,4,離心5min,取上清,測(cè)定485nm下的吸光值。計(jì)算ΔA=A測(cè)定-A對(duì)照。


三、脫氫酶活力計(jì)算
酶活單位定義:在37時(shí),每小時(shí)每克組織樣本使反應(yīng)體系吸光值每增加0.01為一個(gè)酶活單位。
脫氫酶活性(U/g/h)=ΔA÷0.01÷T÷W=33×ΔA÷W
T:反應(yīng)時(shí)間,3h;W:樣本質(zhì)量,g。
注意事項(xiàng):

  1. 配制好的試劑一避光保存于4,盡量在一周內(nèi)使用,若出現(xiàn)紅色,則不能使用。

  2. 試劑三易揮發(fā),有毒,為了您的健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服,戴口罩,戴乳膠手套操作。

  3. 反應(yīng)完成后立即冰浴以終止反應(yīng),并去除干凈殘留的反應(yīng)液。

  4. 如果測(cè)定出來的吸光值較大,需把樣本適當(dāng)稀釋再進(jìn)行測(cè)定,注意計(jì)算公式乘以稀釋倍數(shù)。

實(shí)驗(yàn)實(shí)例:

  1. 稱取1g蘆薈葉片,用雙蒸水清洗3-4次,用濾紙吸干水分,按照測(cè)定步驟進(jìn)行操作,測(cè)得計(jì)算ΔA=A測(cè)定-A對(duì)照=0.120-0.012=0.108,計(jì)算酶活得:

脫氫酶活性(U/g/h)=33×ΔA÷W=3.5964 U/g/h。
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植物脫氫酶(PDHA)活性檢測(cè)試劑盒 其它 植物脫氫酶(PDHA)活性檢測(cè)試劑盒 其它

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