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  • 土壤尿酸酶活性檢測試劑盒
產(chǎn)品名稱:

土壤尿酸酶活性檢測試劑盒

產(chǎn)品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價格:
廠商性質: 生產(chǎn)廠家 產(chǎn)品時間: 2024-04-16
儲存條件
2-8℃
中文名稱
土壤尿酸酶活性檢測試劑盒
有效期
6個月
單位

英文名稱
Soil uricase Activity Assay Kit
檢測方法
紫外分光光度法 Spectrophotometer
規(guī)格
50T/24S
自備試劑
該試劑盒實驗過程中需自備試劑,詳情見網(wǎng)站說明書

產(chǎn)品概述

品牌SOLARBIO/索萊寶CAS詳詢
分子式詳詢純度詳詢
分子量詳詢貨號BC4410
規(guī)格50T/24S供貨周期現(xiàn)貨
主要用途土壤尿酸酶活性檢測應用領域環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),綜合

土壤尿酸酶活性檢測試劑盒說明書

紫外分光光度法

貨號:BC4410

規(guī)格50T/24S

產(chǎn)品組成:使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致,有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱

規(guī)格

保存條件

試劑一

液體2 mL×1瓶(自備)

2-8℃保存

試劑二A

液體0.5 mL×1

2-8℃保存

試劑二B

液體17.5 mL×1

2-8℃保存

試劑三

液體40 mL×1

2-8℃保存

試劑四

液體60 mL×1

2-8℃保存

標準品

液體1 mL×1

2-8℃保存

溶液的配制:

1、試劑一:自備甲苯;

2、試劑二:臨用前按照試劑二A液︰試劑二B= 135的比例混合,根據(jù)樣本量所需使用當天現(xiàn)配現(xiàn)用;

3、標準品:5 µmol/mL的尿酸溶液。

產(chǎn)品說明:

土壤尿酸酶(Soil Uricase,S-UR)是一種與核酸代謝有關的氧化還原酶,主要是將土壤中的核酸腺嘌呤與尿酸等物質轉化成尿*素和尿囊酸,進而生成尿素供植物利用。

土壤尿酸酶能夠催化尿酸生成尿*素、CO2H2O2,尿酸在284 nm有特征吸收峰,通過測定反應前后尿酸的減少量,來表示土壤尿酸酶活性。

注意:實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。

需自備的儀器和用品:

紫外分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、研缽、可調式移液器、1 mL石英比色皿、冰、30~50目篩、甲苯(不允許快遞)和蒸餾水。

操作步驟:

一、 樣本處理(可適當調整待測樣本量,具體比例可以參考文獻)

新鮮土樣自然風干或37℃烘箱風干,過30~50目篩。

二、測定步驟

1、紫外分光光度計預熱30 min以上,調節(jié)波長至284 nm,蒸餾水調零。

2、5 µmol/mL標準溶液用蒸餾水倍比稀釋為0.50.25、0.1250.0625、0.031250.015625 µmol/mL標準溶液待用。

 

3、標準液稀釋可參考下表:

序號

稀釋前濃度(µmol/mL

標準液體積(µL

蒸餾水體積(µL

稀釋后濃度(µmol/mL

1

5

50

450

0.5

2

0.5

200

200

0.25

3

0.25

200

200

0.125

4

0.125

200

200

0.0625

5

0.0625

200

200

0.03125

6

0.03125

200

200

0.015625

備注:實驗中每個標準管需150µL標準溶液。

4、加樣表:

試劑名稱

測定管

對照管

無土管

標準管

空白管

風干土樣(g

0.1

0.1

-

-

-

試劑一(μL

25

25

25

-

-

充分蕩,使土樣全部濕潤,室溫放置30 min

試劑二(μL

500

-

500

-

-

蒸餾水(μL

500

500

500

-

-

試劑三(μL

500

1000

500

-

-

振蕩混勻,30℃恒溫培養(yǎng)24 h10000 rpm25℃,離心10 min,取上清。

上清液(μL

150

150

150

-

-

標準液(μL

-

-

-

150

-

蒸餾水(μL

-

-

-

-

150

試劑四(μL

850

850

850

850

850

充分混勻,1 mL石英比色皿中測定284 nm處吸光值,記為A測定管、A對照管、A無土管、A標準管和A空白管。計算ΔA測定=A無土管-空白管)-A測定管-A對照管)、ΔA標準=A標準管-A空白管。每個測定管需設一個對照管,同一批次樣本檢測無土管、空白管只需檢測1-2,標準曲線只需測1-2

三、土壤尿酸酶活性計算

1、 標準曲線的繪制:

根據(jù)標準管的濃度(x,μmol/mL)和吸光度ΔA標準(y,ΔA標準),建立標準曲線。根據(jù)標準曲線,將ΔA測定(y,ΔA測定)帶入公式計算樣本濃度(x,μmol/mL。

2、 土壤尿酸酶活性的計算:

酶活定義:每天每g土樣中消耗1 μmol的尿酸定義為一個酶活力單位。

土壤尿酸酶活力(U/g 土樣)=x×V反總÷W÷T=1.525x÷W

T:反應時間,1 d = 24 h;V反總:反應體系總體積:1.525 mLW:樣本質量,g。

實驗實例:

1、 稱取兩管2-1-20號土樣0.1g,按照操作步驟進行測定,測得計算ΔA=A無土管-空白管)-A測定管-A對照管)=1.136-0.001-0.703-0.05=0.482,帶入標準曲線y=1.7444x - 0.0013,計算x=0.2771,按照計算公式計算酶活得:

土壤尿酸酶活力(U/g 土樣)= 1.525×x÷W=1.525×0.2771÷0.1=4.226 U/g 土樣。

土壤尿酸酶活性檢測試劑盒 

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