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  • 土壤中性木聚糖酶活性檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品名稱:

土壤中性木聚糖酶活性檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價(jià)格:
廠商性質(zhì): 生產(chǎn)廠家 產(chǎn)品時(shí)間: 2024-04-23
儲(chǔ)存條件
2-8℃
有效期
6個(gè)月
中文名稱
土壤中性木聚糖酶活性檢測(cè)試劑盒
單位

英文名稱
Soil Neutral Xylanase(S-NEX)Activity Assay Kit
檢測(cè)方法
可見分光光度法
規(guī)格
50T/24S

產(chǎn)品概述

品牌SOLARBIO/索萊寶CAS詳詢
分子式詳詢純度詳詢
分子量詳詢貨號(hào)BC5730
規(guī)格50T/24S供貨周期現(xiàn)貨
主要用途土壤酸性木聚糖酶活性檢測(cè)應(yīng)用領(lǐng)域環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),綜合

土壤中性木聚糖酶(S-NEX)活性檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書

可見分光光度法

貨號(hào):BC5730

規(guī)格:50T/24S

產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱

規(guī)格

保存條件

緩沖液

液體25mL×1瓶

2-8℃保存

試劑一

液體12mL×1瓶

2-8℃保存

試劑二

液體16mL×1瓶

2-8℃保存

標(biāo)準(zhǔn)品

粉劑×1

2-8℃保存

溶液的配制:

1、 標(biāo)準(zhǔn)品:10mg木糖。臨用前加入667μL蒸餾水配制成100μmol/mL的木糖標(biāo)準(zhǔn)液,2-8℃保存8周。

產(chǎn)品說(shuō)明:

土壤中性木聚糖酶(Soil neutral xylanase, S-NEX),又稱為土壤中性半纖維素酶,主要分離自最適生長(zhǎng)pH6-8的微生物。

在中性環(huán)境中,S-NEX催化木聚糖降解成還原性寡糖和單糖,在沸水浴條件下進(jìn)一步與3,5-二硝基水楊酸發(fā)生顯色反應(yīng),在540nm處有特征吸收峰,反應(yīng)液顏色的深淺與酶解產(chǎn)生的還原糖量成正比,通過(guò)測(cè)定反應(yīng)液在540nm吸光值增加速率,可計(jì)算S-NEX活性。

注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。

需自備的儀器和用品:

可見分光光度計(jì)、1mL玻璃比色皿、天平、低溫離心機(jī)、水浴鍋、研缽、30~50目篩、蒸餾水。

操作步驟:具體的操作步驟請(qǐng)見“產(chǎn)品資料"文件

一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量,具體比例可以參考文獻(xiàn)

新鮮土樣自然風(fēng)干或37℃烘箱風(fēng)干,過(guò)30~50目篩。

二、測(cè)定步驟

1、 可見分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至540nm,蒸餾水調(diào)零。

2、 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:臨用前將標(biāo)準(zhǔn)品用蒸餾水稀釋為1.5、1.2、1、0.80.6、0.4μmol/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液待測(cè)。

3、 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋表:

序號(hào)

稀釋前濃度(μmol/mL

標(biāo)準(zhǔn)品體積(μL

蒸餾水體積(μL

稀釋后濃度(μmol/mL

1

100

100

900

10

2

10

150

850

1.5

3

10

120

880

1.2

4

10

150

1350

1

5

1

400

100

0.8

6

1

300

200

0.6

7

1

200

300

0.4

備注:實(shí)驗(yàn)中每管需要300μL。

4、 樣本測(cè)定(在EP管中加入下列試劑)

試劑名稱(μL

對(duì)照管

測(cè)定管

空白管

標(biāo)準(zhǔn)管

樣本

0.1g

0.1g

-

-

緩沖液

400

400

-

-

試劑一

-

200

-

-

渦旋混勻,置于50℃水浴鍋中反應(yīng)2h,立即沸水浴中10min滅活。(注意不要讓蓋子爆開,以免進(jìn)水,改變了反應(yīng)體系),冷卻至室溫。

-

-

試劑一

200

-

-

-

常溫,12000g離心10min,取上清

-

-

上清液

300

300

-

-

蒸餾水

-

-

300

-

標(biāo)準(zhǔn)品

-

-

-

300

試劑二

200

200

200

200

渦旋混勻,沸水浴中準(zhǔn)確顯色5min(注意不要讓蓋子爆開,以免進(jìn)水改變了反應(yīng)體系),冷卻至室溫。

蒸餾水

500

500

500

500

充分混勻,于1mL玻璃比色皿中測(cè)定540nm下的吸光度,分別記為A對(duì)照、A測(cè)定、A空白、A標(biāo)準(zhǔn)。計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定-A對(duì)照,ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A空白??瞻坠芎蜆?biāo)準(zhǔn)曲線只需測(cè)1-2次。每個(gè)測(cè)定管需設(shè)一個(gè)對(duì)照管。


注意事項(xiàng):

1. 若樣本ΔA<0.01,可適當(dāng)增大樣本量或者延長(zhǎng)50℃反應(yīng)時(shí)間后測(cè)定;若樣本ΔA>1.5或者A測(cè)定>1.5時(shí),可用蒸餾水稀釋上清液后測(cè)定,注意同步修改計(jì)算公式中的稀釋倍數(shù)。

2. 建議使用螺旋管,防止沸水浴過(guò)程中蓋子爆開,改變反應(yīng)體系。

實(shí)驗(yàn)實(shí)例:

1、 取0.1g野蘑菇土,按操作表進(jìn)行第一步反應(yīng)2h后,取上清液用蒸餾水稀釋2倍后按照測(cè)定步驟操作,用1mL玻璃比色皿測(cè)得ΔA測(cè)定=A測(cè)定- A對(duì)照=0.498-0.108=0.390,帶入標(biāo)曲y=0.5887x-0.1537(R2=0.9982),計(jì)算x=0.924,按樣本質(zhì)量計(jì)算S-NEX活性得:

S-NEX活性(U/g 土樣)=0.3× x÷W×F =5.544 U/g 土樣。

相關(guān)系列產(chǎn)品:

BC5720/BC5725  土壤酸性木聚糖酶(S-ACX)活性檢測(cè)試劑盒

BC5740/BC5745  土壤堿性木聚糖酶(S-BAX)活性檢測(cè)試劑盒


土壤中性木聚糖酶活性檢測(cè)試劑盒 土壤中性木聚糖酶活性檢測(cè)試劑盒


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