品牌 | SOLARBIO/索萊寶 | CAS | 詳詢 |
---|---|---|---|
分子式 | 詳詢 | 純度 | 詳詢 |
分子量 | 詳詢 | 貨號 | BC0915 |
規(guī)格 | 100T/48S | 供貨周期 | 現貨 |
主要用途 | 谷*酰胺合成酶(GS)活性檢測 | 應用領域 | 環(huán)保,化工,生物產業(yè),農林牧漁,綜合 |
谷*酰胺合成酶(GS)活性檢測試劑盒說明書
微量法
注意:本產品試劑有所變動,請注意并嚴格按照該說明書操作。
貨號:BC0915
規(guī)格:100T/48S
產品組成:使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致,有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。
試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
提取液 | 液體60 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑一 | 液體10 mL×1瓶 | -20℃保存 |
試劑二 | 液體10 mL×1瓶 | -20℃保存 |
試劑三 | 粉劑×2瓶 | -20℃保存 |
試劑四 | 液體15 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
溶液的配制:
試劑三:臨用前取一瓶加入5mL蒸餾水充分溶解備用,用不完的試劑-20℃分裝可保存4周,避免反復凍融。
產品說明:
GS(EC 6.3.1.2)主要存在于植物中,是生物體內氨同化的關鍵酶之一,催化銨離子和谷*酸合成谷*酰胺,不僅可以防止過多的銨離子對生物有毒性,而且谷*酰胺也是氨的主要儲存和運輸形式。
GS在ATP和Mg2+存在下,催化銨離子和谷*酸合成谷*酰胺;谷*酰胺進一步轉化為γ-谷氨?;惲u肟酸,在酸性條件下與鐵形成紅色的絡合物;該絡合物在540nm處有最大吸收峰,可用分光光度計測定。
注意:實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽/勻漿器/細胞破碎儀、冰和蒸餾水。
操作步驟:具體操作步驟詳見“產品資料"附件
實驗實例:
稱取0.125g 小鼠腎臟,加入1mL提取液進行冰浴勻漿,按照測定步驟操作,用96孔板測得計算?A=A測定-A對照=0.228-0.07=0.158,帶入公式計算:
GS(U/g 質量)=38×ΔA÷W =48.032 U/g 質量。
稱取0.110g 小鼠肝臟,加入1mL提取液進行冰浴勻漿,按照測定步驟操作,用96孔板測得計算?A=A測定-A對照=0.76-0.067=0.693,帶入公式計算:
GS(U/g 質量)=38×ΔA÷W =239.4 U/g 質量。
稱取0.158g 黃豆芽,加入1mL提取液進行冰浴勻漿,按照測定步驟操作,用96孔板測得計算?A=A測定-A對照=0.142-0.089=0.053,帶入公式計算:
GS(U/g 質量)=38×ΔA÷W =12.747 U/g 質量。
相關發(fā)表文獻:
Zhao B, Tian M, An Q, et al. Characteristics of a heterotrophic nitrogen removal bacterium and its potential application on treatment of ammonium-rich wastewater[J]. Bioresource technology, 2017, 226: 46-54.
Su Yilu,Zhou Zhi,Yu Xiaopeng.Possible roles of glutamine synthetase in responding to environmental changes in a scleractinian coral[J].Molecular biology reports,2018,45(6).
Fei Ding,Qiannan Hu,Meiling Wang,Shuoxin Zhang.Knockout of SlSBPASE Suppresses Carbon Assimilation and Alters Nitrogen Metabolism in Tomato Plants[J].International Journal of Molecular Sciences,1999,19(12):4046.
Jie Wang,Wei Zhou,Hui Chen,Jiao Zhan,Chenliu He,Qiang Wang.Ammonium Nitrogen Tolerant Chlorella Strain Screening and Its Damaging Effects on Photosynthesis[J].other,-1,9(-1):3250.
Shan Li,Yonghang Tian,Kun Wu,Yafeng Ye,Jianping Yu,Jianqing Zhang,Qian Liu,Mengyun Hu,Hui Li,Yiping Tong,Nicholas P. Harberd,Xiangdong Fu.Modulating plant growth-metabolism coordination for sustainable agriculture[J].other,-1,560(7720):595–600.
參考文獻:
Haghighat N. Estrogen (17β-Estradiol) enhances glutamine synthetase activity in C6-glioma cells[J]. Neurochemical research, 2005, 30(5): 661-667.
Bressler S L, Ahmed S I. Detection of glutamine synthetase activity in marine phytoplankton: optimization of the biosynthetic assay[J]. Mar. Ecol. Prog. Ser, 1984, 14: 207-217
相關系列產品:
BC0080/BC0085 硝酸還原酶(NR)活性檢測試劑盒
BC1450/BC1455 谷*酰胺酶(GLS)活性檢測試劑盒
BC1460/BC1465 谷*酸脫氫酶(GDH)活性檢測試劑盒
BC0070/BC0075 谷*酸合成酶(GOGAT)活性檢測試劑盒
谷*酰胺合成酶(GS)活性檢測試劑盒 微量 谷*酰胺合成酶(GS)活性檢測試劑盒 微量