品牌 | SOLARBIO/索萊寶 | 貨號 | BC3590 |
---|---|---|---|
規(guī)格 | 50管/48樣 | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
主要用途 | 過氧化氫濃度測定 |
過氧化氫測定盒 比色法
貨號:BC3590
規(guī)格:50T/48S
試劑一:丙酮 100mL×1 瓶,4℃保存;(自備)
試劑二:粉劑×1 瓶,4℃保存;臨用前加入 6mL 濃鹽酸充分溶解備用。用不完的試劑 4℃保存;
試劑三:液體 12mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:液體 60mL×1 瓶,4℃保存;
標準品:液體 1mL×1 支,4℃保存。1mmol/mL H 2 O 2 標準液
H 2 O 2 是生物體內(nèi)常見的活性氧分子,主要由 SOD 和 XOD 等催化產(chǎn)生,由 CAT 和 POD 等催化降解。H 2 O 2 不僅是重要的活性氧之一,也是活性氧相互轉(zhuǎn)化的樞紐。一方面,H 2 O 2 可以直接或間接地氧化細胞內(nèi)核酸,蛋白質(zhì)等生物大分子,并使細胞膜遭受損害,從而加速細胞的衰老和解體;另一方面 H 2 O 2 也是許多氧化應急反應中的關鍵調(diào)節(jié)因子。
H 2 O 2 與硫酸鈦生成黃色的過氧化鈦復合物,在 415nm 有特征吸收。
可見分光光度計、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1 mL 玻璃比色皿、丙酮 100mL、濃鹽酸 5mL、
研缽和冰。
一、H 2 O 2 提?。?/strong>
1、細菌、細胞或組織樣品的制備
收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照每 500 萬細菌或細胞加入 1mL 試劑一,超聲波破碎細菌或細胞(功率 20%,超聲 3 秒,間隔 10 秒,重復 30 次);8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
2、組織樣品的制備
稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 試劑一進行冰浴勻漿;8000g 4℃離心 10min,取全部上清液(注意吸取干凈),置冰上待測。
3、血清(漿)樣品
按照每 100μL 血清(漿)加入 1mL 試劑一的比例充分混勻。
注意事項:
1、由于試劑一易揮發(fā),試劑一必須先預冷再加,研磨時必須在冰上研磨。
2、本試劑盒中試劑的揮發(fā)性較高,請帶一次性手套和口罩。
二、測定步驟和加樣表
1、分光光度計或酶標儀預熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長 415nm,蒸餾水調(diào)零。
2、將試劑二、三和四 37℃(哺乳動物)或 25℃(其它物種)水浴 10min 以上。
3、將 1mmol/mL 標準液稀釋為 1μmol/mL 的標準溶液。
4、在 EP 管中按順序加入下列試劑
試劑名稱 測定管 標準管 對照管
樣本 吸取的量為全部上清液
1.25umol/mL 標準溶液 1000
試劑一 1000
試劑二 100 100 100
試劑三 200 200 200
4000g,常溫離心 10min,棄上清,留沉淀
試劑四 1000 1000 1000
加入試劑四溶解沉淀(可用丙酮清洗 3-5 次先洗去植物色素),室溫靜置 5min,倒入比色皿中,415nm 處,蒸餾水調(diào)零,記錄測定管吸光度。對照管只需做一次即可。計算?A 測定=A 測定管-A 對照管,?A 標準=A 標準管-A 對照管。
三、H 2 O 2 含量計算:
1、按照細菌、細胞個數(shù)計算:
細菌或細胞中 H 2 O 2 含量(μmol/10 4 細菌或細胞)=?A 測定÷(?A 標準÷C 標液)×V 樣本÷(500×V樣本÷V 提取)=0.002×?A 測定÷?A 標準。
2、按組織鮮重計算:
組織中 H 2 O 2 含量(μmol/g 鮮重)=?A 測定÷(?A 標準÷C 標液)×V 樣本÷(V 樣本÷V 提取×W)=?A 測定÷?A 標準÷W。
3、按照蛋白濃度計算:
H 2 O 2 含量(μmol/mg prot)=?A 測定÷(?A 標準÷C 標液)×V 樣本÷(Cpr×V 樣本)=?A 測定÷?A 標準÷Cpr。
4、按血清(漿)體積計算:
血清(漿)中 H 2 O 2 含量 μmol/mL 血清(漿)=?A 測定÷(?A 標準÷C 標液)×V 樣本÷V 血清(漿)=10×?A 測定÷?A 標準。
500:細胞個數(shù),以萬計;C 標液:H 2 O 2 標準溶液濃度,1μmol/mL;V 樣本:加入的樣本體積,1mL;W:組織鮮重,g;V 提?。禾崛∵^程中所用體積,1mL;Cpr:樣品蛋白濃度,mg/mL;V血清(漿):所用血清(漿)體積,0.1mL。
過氧化氫測定盒 比色法訂購說明:
1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨,一般情況下都能訂貨當日發(fā)貨。
2、部分非常用產(chǎn)品,需提前1-2日預訂,海外期貨則需要提前3-6周預訂。
3、部分產(chǎn)品價格會因貨期、批次等因素發(fā)生變化,若有變動以訂貨當日新價格為準。
4、每日訂單截止時間為16點整,部分城市可到17點整,因超過截止時間造成當日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。
5、請辦理完貨款后,將底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知我們。
過氧化氫測定盒 比色法運輸說明:
極低溫產(chǎn)品:極低溫產(chǎn)品運輸過程中加裝干冰運輸。用干冰把產(chǎn)品包裹起來,再用泡沫盒密封,膠帶層層粘住泡沫盒,放入索萊寶的箱子,然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實驗保駕護航。
低溫產(chǎn)品:低溫產(chǎn)品運輸過程中加裝索萊寶冰袋運輸。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來,再使用泡沫盒密封,用膠帶嚴實密封泡沫盒,再放入索萊寶的箱子(保溫效果少可以持續(xù)一周),然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實驗保駕護航。
常溫產(chǎn)品:常溫產(chǎn)品運輸過程中無需加冰或者特殊包裝。產(chǎn)品由公司庫房人員快速配貨,準確快速高效的快遞保證產(chǎn)品快速送達您的手中。